158日目。

今日の予定

・セミナー（実験報告　4年×2）
・実験（QIAGEN midiprepの続き　lysate回収→IP)

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実験がうまくいかない。

ある蛋白質のdimerizeの確認の実験を行っているのだけれど、蛋白の発現量がそろわない（co-transfectionしたときに発現量がぐっと落ちる）のと、目的の蛋白が抗体のlight chainにかぶるので、IPをmouseの抗体を使い、IBにratの抗体を使ったのに、ratの2次抗体がmouseの抗体を認識したため、やっぱりかぶる。

次回は、IPにmouseの抗体を使って、IBにrabbitの抗体を使うしかないんだろうなあ。。。

まともに、westernが出来ないのはぼくの実験においては致命的。


ていうか、この1ヵ月半実験がまったく進んでいないことに気がつき、ひどく焦りを感じた。
うちの研究室は実験報告がM1の場合1年に2回なのだけれど、ほかの研究室だと毎週報告会が当たり前だそうではないか。どうするのだ。本当に。。。

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とりあえずの改善点
・lysis bufferを別の組成に変えてみる
・transferをsemidryからwetに変えてみる
・transfectionするDNA量をある程度に抑えてみる
・丁寧に作業する

これでうまくいけばもちろんよいのだけど、こうした改善点を突き詰めても、思うような結果が出なかったとき、ぼくは自分自身を納得させることができるだろうか？